V Brazilian consensus guidelines for detection of anti-cell autoantibodies on hep-2 cells

Abstract Background: The V Brazilian Consensus for determination of autoantibodies against cellular constituents on HEp-2 cells, held in Brasilia (DF, Brazil) on August 27, 2016, discussed the harmonization between the Brazilian Consensus on ANA (BCA) guidelines and the International Consensus on ANA Patterns (ICAP) recommendations (www.anapatterns.org). Initial guidelines were formulated by the group of Brazilian experts with the purpose of guiding and enabling Brazilian clinical laboratories to adopt recommendations and to provide a common standard for national and international consensuses. Mainbody: Twenty Brazilian researchers and experts from universities and clinical laboratories representing the various geographical regions of the country participated in the meeting. Three main topics were discussed, namely the harmonization between the BCA guidelines and latest recommendations of the ICAP initiative, the adjustment of the terminology and report on HEp-2 patterns, and a reassessment of quality assurance parameters. For the three topics, our aim was to establish specific guidelines. All recommendations were based on consensus among participants. There was concrete progress in the adjustment of the BCA guidelines to match the ICAP guidelines. To a certain extent, this derives from the fact that ICAP recommendations were largely based on the algorithm and recommendations of the IV Brazilian ANA Consensus, as consistently recognized in the ICAP publications and presentations. However, although there is great overlap between the two Consensuses, there are some point divergences. These specific items were individually and extensively discussed, and it was acknowledged that in several points ICAP improved recommendations previously issued by the Brazilian ANA Consensus and these changes were readily implemented. Regarding some specific topics, the BCA panel of experts felt that the previously issued recommendations remained relevant and possibly will require further discussion with ICAP. The term anti-cell antibodies was adopted as the recommended designation, recognizing that the assay addresses antibodies against antigens in the nucleus and in other cell compartments. However, the acronym ANA HEp-2 was maintained due to historical and regulatory reasons. It was also signalized that the latest trend in ICAP is to adopt the term Indirect Immunofluorescent Assay on HEp-2 cell substrate (HEp-2 IIFA). In addition, the quality assurance strategies previously presented were ratified and emphasized. Conclusion: The V BCA edition was successful in establishing an overall harmonization with the ICAP recommendations for interpretation of the HEp-2 IIFA test, pinpointing the perspectives in filling the remaining gaps between both initiatives.

IV Consenso Brasileiro para pesquisa de autoanticorpos em celulas HEp-2 / IV Brazilian Guidelines for autoantibodies on HEp-2 cells

Objetivo: O IV Consenso Brasileiro para Pesquisa de Autoanticorpos em Células HEp-2 (FAN) realizado em Vitória (ES), no dia 18 de setembro de 2012, objetivou discutir estratégias e recomendações relacionadas ao procedimento técnico, à padronização e à interpretação dos resultados da pesquisa de autoanticorpos em células HEp-2. Métodos: Participaram do evento 23 pesquisadores e especialistas de Universidades e laboratórios brasileiros. Foram abordados diferentes tópicos, discutidos amplamente a fim de se estabelecer recomendações específicas. Resultados e conclusão: O IV Consenso integrou à árvore de decisão o padrão citoplasmático em Anéis e Bastões, o padrão nuclear pontilhado Quasi-homogêneo (QH) e o padrão misto CENP-F. Discutiu-se ainda a necessidade de atenção para a classificação do padrão misto relacionado à presença de anticorpos anti-DNA topoisomerase I (Scl70), compreendendo os componentes nuclear pontilhado fino, nucleolar homogêneo, NOR na placa metafásica e citoplasmático pontilhado fino. Foram sugeridas diretrizes para o controle de qualidade do teste, diluição de triagem e diluição de esgotamento, e foi emitido alerta quanto à necessidade de atenção em relação à heterogeneidade de substratos disponíveis no mercado e a utilização de metodologias automatizadas para detecção de autoanticorpos. .

Objective: The Fourth Brazilian Consensus for Autoantibodies Screening in HEp-2 Cells (ANA) was held in Vitória, Espírito Santo, and aimed to discuss strategies and recommendations about the technique, standardization, interpretation and quality control of the indirect immunofluorescence reaction on HEp-2 cells. Methods: Twenty three ANA experts from university centers and private laboratories in different areas from Brazil discussed and agreed upon recommendations for the fourth edition of the Brazilian Consensus for Autoantibodies Screening in HEp-2 Cells. Results and conclusion: The 4th ANA Consensus included three novel patterns into the existing algorithm (cytoplasmic Rods and Rings, nuclear Quasi-homogeneous, and CENP-F). Emphasis was given to the need of attention in describing the peculiar mixed pattern elicited by anti-DNA topoisomerase I (Scl-70) autoantibodies, comprising nuclear fine specked, nucleolar homogeneous pattern, NOR staining in metaphase plates, and cytoplasmic fine speckled patterns. The group also emphasized the need for continuous quality control in indirect immunofluorescence assays, the establishment of screening dilutions, as well as conjugate titration. An alert was made regarding the heterogeneity of commercial kits in defining patterns and the use of solid phase methodologies to determine the presence of autoantibodies. .

III Consenso Brasileiro para Pesquisa de Autoanticorpos em Células HEp-2: perspectiva histórica, controle de qualidade e associações clínicas / Third Brazilian Consensus for Autoantibodies Screening in HEp-2 Cells: historical perspective, quality control and clinical associations

OBJETIVO: O III Consenso Brasileiro para Pesquisa de Autoanticorpos em Células HEp-2 (FAN) objetivou discutir estratégias para controlar a qualidade do ensaio, promover a atualização das associações clínicas dos diversos padrões e avaliar as dificuldades de implantação do II Consenso ocorrido no ano de 2002. MÉTODOS: Nos dias 13 e 14 de abril de 2007 participaram do encontro em Goiânia pesquisadores e especialistas de diversos centros universitários e laboratórios clínicos de diferentes regiões do Brasil, com o propósito de discutir e aprovar as recomendações que visam a melhores padronização, interpretação e utilização do ensaio pelos clínicos. Foram convidados como ouvintes representantes comerciais de diferentes empresas produtoras de insumos para realização do teste de FAN. RESULTADOS E CONCLUSÃO: Dada a heterogeneidade de microscópios e reagentes disponíveis no mercado, o III Consenso enfatizou a necessidade do controle de qualidade em ensaios de imunofluorescência indireta. Foram também feitas algumas adequações na terminologia utilizada para classificar os diferentes padrões. Finalmente, foi realizada uma atualização das associações clínicas com finalidade de facilitar cada vez mais o melhor uso do ensaio pelos clínicos.

OBJECTIVE: The Third Brazilian Consensus for Autoantibodies Screening in HEp-2 Cells (ANA) had as purpose the evaluation of difficulties in the accomplishment of the 2nd Consensus recommendations that took place in the year of 2002, the discussion of strategies for quality control of the assay and the discussion of an update of the clinical associations of the several immunofluorescent patterns. METHODS: Several ANA experts from university centers and private laboratories in different areas in Brazil joined the workshop in Goiânia on 2007 April 13 and 14 with the purpose of discussing and approving the recommendations for standardization, interpretation and use of the test by physicians. Commercial representatives of different ANA slide brands were also invited as listeners to the workshop. RESULTS AND CONCLUSION: The 3rd ANA Consensus emphasized the need for quality control in indirect immunofluorescent assays since there is a considerable heterogeneity of available microscopes and reagents. It also promoted adaptations in the previously approved terminology used to classify the different patterns and finally updated the clinical associations of the several patterns with the purpose of providing guidance for interpretation of the assay by clinical pathologists and assistant physicians.

3º Consenso Brasileiro para pesquisa de autoanticorpos em células HEp-2 (FAN): recomendações para padronização do ensaio de pesquisa de autoanticorpos em células HEp-2, controle de qualidade e associações clínicas / Third Brazilian Consensus for autoantibodies screening in HEp-2 cells (ANA): recommendations for standardization of autoantibodies screening trial in HEp-2 cells, quality control and clinical associations

OBJETIVO: O 3º Consenso Brasileiro para pesquisa de autoanticorpos em Células HEp-2 (FAN) teve como propósito avaliar as dificuldades de implantação do 2º Consenso ocorrido no ano de 2002, discutir estratégias para controlar a qualidade do ensaio e promover a atualização das associações clínicas dos diversos padrões. MÉTODOS: Participaram do encontro em Goiânia nos dias 13 e 14 de abril de 2008 pesquisadores e especialistas de diversos centros universitários e laboratórios clínicos de diferentes regiões do Brasil, com o propósito de discutir e aprovar as recomendações que visam à melhor padronização, interpretação e utilização do ensaio pelos clínicos. Representantes comerciais de diferentes empresas produtoras de insumos para realização do teste de FAN foram convidados como ouvintes. RESULTADOS E CONCLUSÕES: O 3º Consenso enfatizou a necessidade do controle de qualidade em imunofluorescência dada a heterogeneidade de microscópios e reagentes disponíveis no mercado, promoveu adequações na terminologia utilizada para classificar os diferentes padrões e, finalmente, atualizou as associações clínicas com finalidade de facilitar cada vez mais o melhor uso do ensaio pelos clínicos.

OBJECTIVE: The Third Brazilian Consensus for autoantibodies Screening in HEp-2 cells had as purpose the evaluation of difficulties in the accomplishment of the 2nd Consensus recommendations that took place in the year of 2002, the discussion of strategies for quality control of the assay and the promotion of an update of the clinical associations of the several immunofluorescent patterns. METHODS: Several ANA experts from university centers and private laboratories in different areas in Brazil joined the workshop in Goiânia on 2008 April 13 and 14 with the purpose of discussing and approving the recommendations for standardization, interpretation and use of the test by physicians. Commercial representatives of different ANA slide brands were also invited as listeners to the workshop. RESULTS AND CONCLUSIONS: The 3rd Consensus emphasized the need for quality control in indirect immunofluorescent since there is a considerable heterogeneity of available microscopes and reagents. It also promoted adaptations in the previously approved terminology used to classify the different patterns and finally updated the clinical associations of the several patterns with the purpose of providing guidance for interpretation of the assay by clinical pathologists and assistant physicians.

Níveis séricos da proteína oligomérica da matriz cartilaginosa/trombospondina 5 (COMP/TSP-5) em pacientes com artrite reumatóide estratificados para classe funcional / Serum levels of cartilage oligomeric matrix protein (COMP-TSP-5) in patients with rheumatoid arthritis stratified for functional class

Objetivos: avaliar os níveis séricos da proteína oligomérica da matriz cartilaginosa/trombospondina 5 (COMP/TSP-5), potencial marcador de dano articular, em pacientes com artrite reumatóide em diferentes graus funcionais e controles sadios.Pacientes e métodos: o estudo foi transversal controlado. Cinqüenta e oito pacientes com artrite reumatóide em acompanhamento no Ambulatório de Reumatologia do Hospital São Lucas da PUCRS compuseram a população-alvo. A classificação de Hochberg foi utilizada para estimar o grau funcional dos pacientes. O grupo controle consistiu de 100 doadores de sangue consecutivamente selecionados. Os níveis de COMP/TSP-5 foram avaliados através imunoensaio enzimático (AnaMar Medical TM, Lund, Suécia). Níveis acima de 12 U/I foram considerados positivos. A comparação entre os grupos foi obtida por análise de variância e o nível de significância considerado foi de 5%. Resultados: a média de idade foi de 48±6 anos para o grupo controle e de 54±14 anos para pacientes com artrite reumatóide (P>0,05). O sexo feminino predominou no grupo de pacientes com artrite reumatóide (P<0,05). Após ajuste para sexo e idade, os níveis médios de COMP/TSP-5 foram de 7,0 U/L (IC95% 6,1-7,9) para o grupo controle e de 12,6 U/L (IC95% 11,1-14,1) para o grupo de artrite reumatóide (P<0,01). Entre os pacientes com artrite reumatóide, 25 apresentaram grau funcional I (43,1%), 14 grau funcional II (24,13%), 10 grau funcional III (17,2%) e 9 grau funcional IV (15,5%). Com exceção de indivíduos de classe funcional III, pacientes de outras classes funcionais tiveram maior freqüência de teste positivo para COMP/TSP-5 do que controles (P<0,001). Em cada uma das classes funcionais, os níveis médios de COMP/TSP-5 foram significantemente maiores do que os do grupo controle (P<0,05). Os 28 pacientes reumatóides com COMP/TSP-5 elevada se distribuíram uniformemente entre as 4 classes funcionais (P=0,65).

Objective: To evaluate the serum levels of cartilage oligomeric matrix protein/thrombospondin-5 (COMP/TSP-5), a potential marker for articular damage, in patients with rheumatoid arthritis in different functional status and in healthy controls.Patients and methods: The study was cross-sectional. Fifty-eight patients with RA followed in the Outpatient Rheumatology Clinic of São Lucas Hospital of PUCRS comprised the target population. The Hochberg classification was utilized to estimate the functional status of patients with rheumatoid arthritis. The control group included 100 blood donors consecutively selected. Levels of COMP/TSP-5 were evaluated by immunoenzimatic assay (AnaMar Medical TM, Lund, Suecia). Levels above 12 U/I were considered positive. Comparison of groups was obtained by analysis of variation and a 5% significance levels was considered.Results: The medium age was 48±6 years for the control group and of 54±14 years for patients with rheumatoid arthritis (P>0.05). The female gender predominated in the group of rheumatoid arthritis (P<0.05). After adjustment for sex and age, the average levels of COMP/TSP-5 were 7.0 U/L (95%CI 6.1-7.9) for the control group and of 12.6 U/L (95%CI 11.1-14.1) for patients with rheumatoid arthritis (P<0.01). Among rheumatoid patients, 25 showed functional class I (43.1%), 14 functional class II (24.13%), 10 functional class III (17.2%), and 9 class functional IV (15.5%). With the exception of individuals with class functional III, patients from the other functional status presented higher frequency of positive test for COMP/TSP-5 as compared to controls (P<0.001). In each of the functional classes, the average levels of COMP/TSP-5 were significangly higher that those of the control group (P<0.05). The 28 rheumatoid patients with elevated COMP/TSP-5 were distributed uniformly in all 4 functional classes (P=0.65).

Síndrome antifosfolipídica e morbidade gestacional / Antiphospholipid syndrome and morbidity gestation

A síndrome antifosfolipídica (SAF) é a mais comum das trombofilias adquiridas do adulto jovem. Ocorre de forma primária ou em associação com doenças do conjuntivo, particularmente o lupus eritematoso. A ocorrência de eventos obstrétricos em pacientes com SAF é assunto de grande interesse entre profissionais da área da Reumatologia e Gineco-Obstetricia. Abordamos, neste artigo, aspectos conceituais da SAF e os eventos obstétricos (abortamentos recorrentes, pré-eclâmpsia) relacionados à presença dos anticorpos contra fosfolípides.

Síndrome do desconforto respiratório agudo / Acute respiratory distress syndrome

A síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) compreende uma manifestação clínica severa, caracterizada por lesão pulmonar aguda, edema pulmonar não-cardiogênico, hipoxia refratária e diminuição da complacência pulmonar. O objetivo dos autores é revisar a literatura sobre os principais aspectos relacionados com a síndrome do desconforto respiratório agudo e com a lesão pulmonar aguda (LPA). Os autores revisaram artigos publicados em periódicos disponíveis na base de dados MEDLINE, compreendidos entre 1985 e 2002. As palavras-chaves utilizadas na busca foram: síncrome do desconforto respiratório agudo, lesão pulmonar aguda e choque pulmonar. Existem critérios diagnósticos definidos para síndrome do desconforto respiratório agudo e lesão pulmonar aguda (começo agudo, relação PaO2/FiO2 ≤ 200, infiltrados bilaterais na visão frontal da radiografia de tórax e pressão capilar pulmonar ≤ 18mmHg). A atividade endotelial é considerada o principal mecanismo no complexo de eventos patológicos que resultam na SDRA. O balanço entre fatores pró-inflamatórios e entiinflamatórios influencia na resposta inflamatória pulmonar. O objetivo da ventilação em pacientes com SDRA e LPA é manter a adequada troca gasosa e evitar a selão pulmonar induzida pelo ventilador. Ainda não há consenso quanto à melhor forma de definir os níveis de PEEP a serem empregados no tratamento da SDRA. Estudos nível II com baixas doses de corticosteróides na fase fibroproliferativa da SDRA têm demonstrado algum benefício, recebendo nível de recomendação C

Bursite anserina: revisäo diagnóstica e terapêutica / Anserine bursitis: diagnostic and therapeutic review

A bursa anserina tem sido apontada como um freqüente sítio de inflamaçäo. Paradoxalmente, há evidências de que a presença da bursite anserina é muitas vezes näo identificada. Isto ocorre, por um lado, devido ao desconhecimento desta síndrome por parte de muitos médicos e, por outro, devido ao fato de que a dor no joelho pode ser facilmente atribuída à artrose, uma doença freqüentemente encontrada na mesma faixa etária em que a bursite anserina apresenta sua maior prevalência. O tratamento específico proporciona alívio imediato de sintomas, em vários casos, presentes por meses ou até mesmo anos. Aborda-se nesta revisäo os aspectos etiológicos, clínicos, diagnósticos e terapêuticos, objetivando um maior entendimento desta síndrome.